供應商	上海篤瑪生物科技有限公司店鋪
認證
報價	人民幣 2400.00元每盒
關鍵詞	ELISA試劑盒,指標ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒,吸附測定法
所在地	上海市寶山區(qū)河曲路118號6981室

產品詳細介紹

綿羊蛋白酪氨酸酶受體K(PTPRK)ELISA試劑盒

ELISA測定結果如何計算.ELISA測定結果計算如下：1.計算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX )和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX)。2.兩個平均數(shù)的差(P-N)大于一個特定的數(shù)值，例如0.400，試驗才有效。3.3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范圍，則棄去，而已另兩個陰性對照重新計算NCX；如有兩個陰性對照A值超出以上范圍，則該次實驗無效。4.陽性判定值按下式計算：陽性判定值=NCX+0.05。5.標本A值>陽性判定值的為陽性，小于陽性判定值的為陰性。需要注意的是，試劑盒的常數(shù)只適合于該特定條件下，而不是對各種試劑均可通用。

酶聯(lián)吸附法（ELISA）是一種靈敏、特異的學技術，常用于醫(yī)學、生物領域中的抗原或檢測。其使用范圍包括：1.臨床診斷：ELISA可以用于檢測傳染病（如、等）、標志物等，協(xié)助進行診斷。2.食品安全：ELISA可以用于檢測食品中的有害（如殘留、獸藥殘留等），保障食品安全。3.監(jiān)測：ELISA可以用于評估水質、空氣等指標，監(jiān)測狀況。4.生物分子檢測：ELISA可以用于檢測生物分子，如蛋白質、多肽、等，在生物醫(yī)學研究領域廣泛應用?？傊?，酶聯(lián)吸附法在醫(yī)學、生物領域中具有廣泛的應用價值，是臨床診斷和中重要的輔助手段。

標記

良好的酶結合物取決于兩個條件：即價的和高活性的酶。的活性和純度對制備標記至關重要，因為特反應隨活性和純度的而增強。在酶標記中，的活性有所，故需要純度高、效及抗原親和力強的球蛋白使用親和層析提純的，可性，而且可稀釋使用，非特吸附。

酶與交聯(lián)，常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記的改良過碘酸鈉法簡單易行，標記效果好，特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為：將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中，加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉（NaIO4）水溶液0.5ml，混勻置4℃冰箱30分鐘，取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml，室溫放置30分鐘后加入含5g純化的水溶液1ml，混勻并裝透析袋，以0.05mol/L、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時（或過夜）使之結合，然后吸出，加（NaBH4）溶液（5(g/ml)0.2ml，置4℃冰箱2小時，將上述結合物混合液加入等體積飽和銨溶液，置4℃冰箱30分鐘后離心，將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L、pH7.4PBS中，并對之透析過夜（4℃），次日離心除去不溶物，即酶標，用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml，進行測定后，冷凍干燥或低溫保存。

綿羊蛋白酪氨酸酶受體K(PTPRK)ELISA試劑盒

ELISA90分鐘一步法的優(yōu)點主要包括：1.操作簡單：該只需要一步操作即可完成，操作簡單明了，易于。2.快速：ELISA90分鐘一步法可以在短時間內完成，適合于大批量樣品的快速檢測。3.特高：該采用特定的或抗原進行固定和檢測，因此具有較高的特。4.靈敏度高：ELISA90分鐘一步法具有較高的靈敏度，可以檢測出較低濃度的抗原或。5.重復性好：該的重復性，結果較為。6.安全性高：ELISA90分鐘一步法不使用放射性同位素等有害，因此具有較高的安全性。需要注意的是，ELISA90分鐘一步法也存在一些缺點，例如可能會受到非特因素的影響，結果不準確。此外，該的試劑成本較高，不適合于小規(guī)模樣品的檢測。

酶聯(lián)吸附法（ELISA）的原理是利用抗原或與酶的結合，形成酶標抗原或，保持其活性，同時又保留酶的活性。將抗原或與酶連接成酶標記抗原或，它既保留了活性，又保留了酶的活性；在測定時，把受檢標本(含待測或抗原)和酶標抗原或按一定程序與結合在固相載體表面的抗原或起反應形成固相化抗原-酶復合物，用洗滌的使固相載體上形成的抗原-酶復合物與其它成分分離，結合在固相載體上的酶量與標本中受檢的量成一定的比例，加入酶反應的底物后，底物被固相載體上的酶催化生為有色產物，通過定性或定量檢測有色產物的量即可確定樣品中待測的含量。效果測定

測定內容包括酶和活性、結合物中酶含量和IgG含量、酶與IgG摩爾比值以及結合率。

⑴ 酶與的活性　常用瓊脂擴散或電泳法，使抗原與形成沉淀線，經PBS漂洗1天，再以蒸餾水浸泡1小時，將瓊脂凝膠片浸于酶底物溶液中著色，如果出現(xiàn)應有的顏色反應，再用鹽水浸泡，顏色仍然不褪，表示結合物既有酶的活性，也有活性。良好的結合物在顯色后，瓊擴滴度應在1:16以上。另一個測定是用系列稀釋的酶標直接以ELISA進行方陣滴定，此法不僅可以測定標記效果，還可以確定酶標的使用濃度。

⑵ 結合物的定量測定　一般是對結合物中的酶和IgG進行定量測定。常用紫外分光光度計于403nm和280nm進行測定，然后按下列公式計算：

酶量（mg/ml）=OD403×0.42

IgG量（mg/ml）=（OD280－OD403×0.4）×0.94×0.62

對于過碘酸鈉氧化法制備的標記量，按下列公式計算：

IgG量（mg/ml）=（OD280－OD403×0.34）×0.62

已知酶量和IgG量后，即可計算出標記的摩爾（mol）比值。

HRP/IgG摩爾比值=HRP（mg/ml）/IgG（mg/ml）×4

結合物中酶總量=HRP（mg/ml）×結合物溶液量

結合物產率=結合物中酶總量/標記時加入的酶量×

用于ELISA的結合物的酶量為400(g/ml時效果一般，為500(g/ml時效果，達 1000(g/ml時效。mol.比值由于結合物中含的IgG并不完全可靠，所以不能作為主要參數(shù)。一般認為mol.比值為0.7時效果一般，1.0時效果，1.5-2.0。酶結合率為 7%時效果一般，為9%－10%，達30%以上。

90分鐘一步法ELISA試劑盒可以適用于、、組織勻漿、細胞上清液等樣本類型。這些樣本可以用于檢測、和其他微生物等病原體，以及、自身性等病理情況。同時，ELISA試劑盒還可以用于檢測濃度、維生素等營養(yǎng)，以及污染物等有害的殘留量。需要注意的是，不同樣本類型和檢測項目可能對ELISA試劑盒的靈敏度和特產生影響，因此在選擇使用ELISA試劑盒時需要根據具體情況進行選擇。

ELISA試劑盒的用法包括以下步驟：1.包被：用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml，酶標板中每孔加入50μl，室溫、4℃或37℃過夜包被。2.洗滌：棄包被液（拍干，再用無塵紙吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次（每孔均要加滿），每次3min~5min。3.封閉：每孔加封閉液（1%BSA）250μl，37℃封閉2h。4.洗滌：用1×PBST洗滌液洗板3次，每次3min~5min。5.加樣：加入已經稀釋好的樣品，37℃反應1h。一般樣本加入50-100μl，充分混勻。6.洗滌：用洗滌液洗板3次，每次3min~5min。7.加入酶標試劑：每孔加入100μl酶標溶液，37℃，1h。8.洗滌：用洗滌液洗板3次，每次3min~5min。9.顯色：每孔先加入顯色劑A液50μl，再加入顯色劑B液50μl，37℃避光10-15min。10.終止及測定：加入50μl終止液，終止反應，用酶標儀在450nm波長處測OD值。

所屬分類：化學助劑/試劑盒

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主營產品: ELISA試劑盒,ELISA檢測試劑盒,標準品,生化試劑

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