人主動脈瓣膜間質細胞
基本屬性:
細胞名稱:人主動脈瓣膜間質細胞
組織來源:主動脈組織
商品貨號:LZ-YX9739
種屬來源:人
產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介:
主動脈瓣施半月瓣,位于左心室和主動脈之間,抑制射入主動脈的血液回流入左心室。主動脈瓣鈣化可引起主動脈瓣狹窄關閉不全等,施導致老年退行性心瓣膜病的重要病理改變,其發(fā)病率隨著年齡的增加而升高。有研究表明,瓣膜間質細胞向城固細胞樣細胞表型轉化有可能是主動脈瓣膜鈣化的病理改變基礎之一。
培養(yǎng)基:原代間質細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):長梭形、不規(guī)則細胞
傳代特性:根據細胞特性
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
使用方法:
在技術部標準操作流程下,建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
3)經1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml完全培養(yǎng)基(補加1%FBS,促進貼壁)重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內;
4)待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基(37℃預熱)。
原代細胞試用的實驗類型:
上海前面我們了解了原代細胞獲取和培養(yǎng)過程中應該注意的一些細節(jié),這有助于我們培養(yǎng)我們的原代細胞。那么原代細胞培養(yǎng)好后,它可適用哪些研究呢?
原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的生物醫(yī)藥產業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。在這些應用中幾乎都涉及了幾個常見的且基礎的細胞實驗,如下:
一、細胞增殖檢測:
人主動脈瓣膜間質型號常見檢測方法:CCK8檢測法 ,MTT檢測法,Brdu檢測法,Edu檢測法,平板克隆形成
二、細胞周期檢測
常見檢測方法:流式檢測細胞周期,標記有絲分裂百分率法
三、細胞凋亡檢測
人主動脈瓣膜間質品牌常見檢測方法:流式檢測細胞凋亡,線粒體膜電位,活性氧檢測,Hoechst染色,電鏡,TUNEL
四、細胞轉移能力檢測
常見檢測方法:細胞劃痕實驗,Transwell實驗,Invasion實驗
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