供應商	上海篤瑪生物科技有限公司店鋪
認證
報價	人民幣 2400.00元每盒
關(guān)鍵詞	ELISA試劑盒,指標ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒,吸附測定法
所在地	上海市寶山區(qū)河曲路118號6981室

產(chǎn)品詳細介紹

兔凋亡調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒特強

ELISA實驗通用規(guī)則

1、要移液槍的準確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M行確定。有人員進行矯正。

2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的后，要更換槍頭。即使是吸取品時。

3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復到室溫，以使結(jié)果更。

4、實驗時，要使底物避光保存。

5、用槍吸取時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。

6、吸取時，要用量程和需要量接近的槍去吸，誤差。

7、將加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)，可使槍頭上的液滴和孔壁，液滴會自然流下去。

8、全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻。也可以用酶標儀的晃動功能。

9、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。

10、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加。沒有洗板機時，倒去后，要將酶標板在報紙或毛紙上拍干。

11、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

12、底物是光的，要在臨用前現(xiàn)配。

13、檢測前，要打開酶標儀，使之10分鐘以上。

14、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免。

15、待檢樣品要澄清，否則會影響結(jié)果。

16、溫浴時間應遵守試劑盒規(guī)定。

17、應盡量做雙孔實驗，這樣才能數(shù)據(jù)的準確性。

18、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它進行確證。

做好對照

正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高，說明有非特反應，可采用羊、兔或BSA等封閉。

ELISA檢劑盒應用定性夾心檢測技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很強的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM，這些就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會與次孵育結(jié)合上的HEV IgM相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應，只有那些含有HEV IgM和酶結(jié)合物所形成的復合物的孔才會發(fā)生顏色變化，加入溶液終止酶和底物間的反應，并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgMelisa試劑盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。

ELISA90分鐘一步法的優(yōu)點主要包括：1.操作簡單：該只需要一步操作即可完成，操作簡單明了，易于。2.快速：ELISA90分鐘一步法可以在短時間內(nèi)完成，適合于大批量樣品的快速檢測。3.特高：該采用特定的或抗原進行固定和檢測，因此具有較高的特。4.靈敏度高：ELISA90分鐘一步法具有較高的靈敏度，可以檢測出較低濃度的抗原或。5.重復性好：該的重復性，結(jié)果較為。6.安全性高：ELISA90分鐘一步法不使用放射性同位素等有害，因此具有較高的安全性。需要注意的是，ELISA90分鐘一步法也存在一些缺點，例如可能會受到非特因素的影響，結(jié)果不準確。此外，該的試劑成本較高，不適合于小規(guī)模樣品的檢測。

兔凋亡調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒特強

實驗條件的選擇

在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:

（1）　固相載體的選擇：許多可作為固相載體，如聚氯、聚、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。常用的是40孔聚凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

（2）包被（或抗原）的選擇：將（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18～24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml。

（3）　酶標記工作濃度的選擇：用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記分別為不同的稀釋度）在正式實驗里準確地滴定其工作濃度。

（4）　酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

所屬分類：化學助劑/試劑盒

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主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA檢測試劑盒,標準品,生化試劑

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