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牛二肽基肽酶VI(DPP6)ELISA試劑盒

更新時間0:2024-12-18 信息編號:s6183sbc9273e8 舉報維權(quán)
牛二肽基肽酶VI(DPP6)ELISA試劑盒
牛二肽基肽酶VI(DPP6)ELISA試劑盒
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牛二肽基肽酶VI(DPP6)ELISA試劑盒
供應(yīng)商 上海篤瑪生物科技有限公司 店鋪
認證
報價 人民幣 2400.00元每盒
關(guān)鍵詞 可定制,人ELISA試劑盒,酶聯(lián)試劑盒,90分鐘一步法
所在地 上海市寶山區(qū)河曲路118號6981室

產(chǎn)品詳細介紹


牛二肽基肽酶VI (DPP6)ELISA試劑盒



ELISA檢劑盒應(yīng)用定性夾心檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,這些就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會與次孵育結(jié)合上的HEV IgM相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgMelisa試劑盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。






組成結(jié)構(gòu):



1、 :操作中避免任何細胞。使用不含熱原和內(nèi)的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。



2、 :EDTA、檸檬酸鹽肝素可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。



3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。



4、 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。



5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。



此IBL試劑盒能用于小鼠,EDTA,細胞上清中白介素-6的定量檢測



試劑盒成分



1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T



2 酶標(biāo)記: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1



3 品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2



4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1



5 標(biāo)記稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1



6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1



7 終止液: 1N 12mL x 1



8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記和顯色劑)



ELISA測定結(jié)果如何計算.ELISA測定結(jié)果計算如下:1.計算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX )和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX)。2.兩個平均數(shù)的差(P-N)大于一個特定的數(shù)值,例如0.400,試驗才有效。3.3個陰性對照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。4.陽性判定值按下式計算:陽性判定值=NCX+0.05。5.標(biāo)本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。需要注意的是,試劑盒的常數(shù)只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。



酶聯(lián)吸附法(ELISA)是一種靈敏、特異的學(xué)技術(shù),常用于醫(yī)學(xué)、生物領(lǐng)域中的抗原或檢測。其使用范圍包括:1.臨床診斷:ELISA可以用于檢測傳染?。ㄈ纭⒌龋?、標(biāo)志物等,協(xié)助進行診斷。2.食品安全:ELISA可以用于檢測食品中的有害(如殘留、獸藥殘留等),保障食品安全。3.監(jiān)測:ELISA可以用于評估水質(zhì)、空氣等指標(biāo),監(jiān)測狀況。4.生物分子檢測:ELISA可以用于檢測生物分子,如蛋白質(zhì)、多肽、等,在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域廣泛應(yīng)用??傊?,酶聯(lián)吸附法在醫(yī)學(xué)、生物領(lǐng)域中具有廣泛的應(yīng)用價值,是臨床診斷和中重要的輔助手段。






牛二肽基肽酶VI (DPP6)ELISA試劑盒



 



 



試驗原理



試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)吸附實驗(ELISA).已知濃度的、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將生物素標(biāo)記的同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。



自備材料



1. 蒸餾水。



2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。



3. 振蕩器磁力攪拌器等。



安全性



1. 避免直接終止液和底物A、B。一旦到這些,請盡快用水沖洗。



2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。



3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。



4. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的品應(yīng)丟棄,不可保存。



5. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。



6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。



7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。



8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。



9. 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。



10. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光,避免長時間于光下。避免用手,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。



11. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。



12. 按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。






牛二肽基肽酶VI (DPP6)ELISA試劑盒





做好對照



正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特反應(yīng),可采用羊、兔或BSA等封閉。



實驗條件的選擇



ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:



(1) 固相載體的選擇:許多可作為固相載體,如聚氯、、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。常用的是40孔聚凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。



(2) 包被(或抗原)的選擇:將(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。



(3) 酶標(biāo)記工作濃度的選擇:用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記分別為不同的稀釋度)在正式實驗里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。



(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMBABTS是較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。






ELISA試劑盒檢測中的注意事項





1、要移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。有人員進行矯正。



2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的后,要更換槍頭。即使是吸取品時。



3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更。



4、實驗時,要使底物避光保存。



5、用槍吸取時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。



6、吸取時,要用量程和需要量接近的槍去吸,誤差。



7、將加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi),可使槍頭上的液滴和孔壁,液滴會自然流下去。



8、全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。



9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。



10、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機時,倒去后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上拍干。



11、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。



12、底物是光的,要在臨用前現(xiàn)配。



13、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之10分鐘以上。



14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免。



15、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。



16、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。



17、應(yīng)盡量做雙孔實驗,這樣才能數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。



18、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它進行確證。








 

所屬分類:化學(xué)助劑/試劑盒

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關(guān)于上海篤瑪生物科技有限公司

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主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA檢測試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑

上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的生物企業(yè)。 總部位于上海,并在全國設(shè)有經(jīng)銷或代理機構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,擁有的研發(fā)和質(zhì)量檢測團隊以及的倉儲和物流系統(tǒng)?!昂V瑪生物”已經(jīng)得到全國科研工作者的認可,成為廣大經(jīng)銷商推崇的品牌。 公司擁有一批的研發(fā)人員,我們專注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新。產(chǎn)品覆蓋面廣,品質(zhì)可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時,提供各種常規(guī)生化試劑,庫存常備產(chǎn)品多達10000多種,可隨時為廣大科研工作者提供各類試劑。在質(zhì)量方面,謹記公司信念:質(zhì)量一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴謹?shù)纳a(chǎn)流程,科學(xué)的質(zhì)量檢測方法和成熟的質(zhì)量檢測程序,我們恪守對每一位用戶的承諾:用的態(tài)度做的品牌。同時,公司組建了一支的技術(shù)服務(wù)隊伍,能夠為科研工作者提供的技術(shù)服務(wù)。每一位購買篤瑪生物產(chǎn)品的用戶都能夠得到的咨詢和完善的售后服務(wù)。

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